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流感疫苗生産(chǎn)的純化過程和設備(bèi)

更新時間:2011-07-11點擊次數:3499
流感疫苗生産的純化過程:
1.       已培養好的帶(dài)病毒的雞(jī)胚用75%酒精消毒;
2.       收集雞(jī)胚尿囊液 :根據(jù)雞(jī)蛋大小收集量略有不同(每隻6-10ml);
3.       尿囊液初濾(lǜ)JST型10μm濾(lǜ)芯過(guò)濾(lǜ);
4.       連續流離心機(jī)或超濾系統過(guò)濾
a.  連續流離心機(jī):用12,000rpm,流量:每分鍾600-800ml,除去雜質,上清液用於(yú)透析濃縮;
b.  Millipore超濾(lǜ)系統(tǒng),0.45μm濾(lǜ)膜,除去雜質
5.       尿囊液的透析濃縮:用Millipore超濾(lǜ)器,1000KD膜包濃縮,濃縮後(hòu)通常爲尿囊液量的1/30;
6.       超速離(lí)心的病毒純(chún)化(略);
7.       福爾(ěr)馬(mǎ)林脫毒;
8.       乙醚裂解;
9.       100KD透析脫(tuō)糖;
10.   去福爾(ěr)馬(mǎ)林;
11.   去乙醚……
12.   幾(jǐ)種流行病毒抗原的混合(如H1N1+H3N2+H2N2)和稀釋(shì)
13.   加入穩(wěn)定劑(jì)
14.   成品
 
離心純化需要準備的儀器和基本材料:
1.       儀(yí)器
a.  阿貝(bèi)折射儀 Abbe  refractometer (測(cè)蔗糖濃度)
b.  Cole parmer 軟(ruǎn)管泵:KH-77913-25
c.  紫外分光光度計或核酸蛋白分析儀(有280nm,260nm波長(zhǎng)的),可以是帶(dài)流動池及記  錄儀,也可以是帶(dài)标準樣品池的)
2.       梯度液
a.        PB緩(huǎn)沖(chōng)液PH7.3
b.       30% w/w蔗糖液(Sucrose,Sigma,AR級(jí))
c.        55% w/w蔗糖液
d.       58% w/w蔗糖液
3.       實(shí)驗(yàn)器具
a.        50ml有刻度玻璃管    100支
b.       500ml有刻度燒(shāo)杯     5支
c.        100ml有刻度燒(shāo)杯     5支
d.       1000ml有刻度量筒    3隻(zhǐ)

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