離心機在血型選取上的應用

輸血時如血型不合會造成患者出現輸血的不良反應，因此使用相符的血型是輸血安全的前提保證。而作爲人類的重要遺傳(chuán)标志-血型，在近年科學的發展下，人們逐步探索分析，已發現300餘種現人類紅細胞血型抗原。當(dāng)今，世界多國正努力建立稀有血型細胞血庫，當(dāng)中對所發現的稀有血型，如Rh、MNSs、P、Kell、Kidd、Lutheran等，建立起稀有血型系統，以保證爲稀有血型的患者更加快速及時地提供合适紅細胞。

中國稀有血型篩選與建庫

在我們的臨床研究中，對於(yú)稀有血型的篩選工作和具體項目中，對於(yú)引發臨床不良輸血反應的稀有血型抗原或是表型組合是zui值得關注的，而事實證明這些稀有抗原或是表型組合往往存在於(yú)如Vel、Lan、Jk（a-b-）、Lu（a-b-）、Rhnull、OH等這些高頻率血型抗原組以及多個血型系統中，與此同時我們也對如Fy（a-b+）、Di（a+b-）等能引起輸血反應和新生兒溶血病的血型抗原的中國人*的免疫反應而進行的篩選，並(bìng)希望建立起符合我國國情的稀有血型庫。以此來解決我國臨床上的稀有血型不足、不良輸血反應的發生等問題來提高我國的輸血療效。
 

尿素溶血試驗

Jk（a-b-）表型的篩選：因稀有血型本身所具有特殊性，充分利用其特點設計出将其篩選出的方法，Kidd血型系統中Jk（a-b-），此種紅細胞可在2M的尿素溶液中使其紅細胞膜在6h以上的時間内保持完整性。而Jka和Jkb抗原的紅細胞在2M尿素溶液中*溶血的時間不超過30s。其操作過程爲：選取RSP加樣器設備(bèi)将标本紅細胞稀釋到1%的懸液中
，並(bìng)在96孔微量闆上加20ul懸液，再将100ul2mol/L尿素溶液加入其中，放置離心機中以800r/min轉速離心3min，溶血爲陽性，不溶血爲陰性，如爲陰性者則進一步對(duì)血細胞做分子生物學分析
。本次通過(guò)Jk（a-b-）尿素篩選實驗，獲得8名Jk（a-b-）表型獻血者。

試管法

将選取标本紅細胞稀釋爲2-5%懸液，标記試管（抗-Mur、-Lub、-Rhmull、-Kell、-MN、-H）並(bìng)加入相應抗血清和标本紅細胞各50ul。採(cǎi)用直接離心法或間接抗球蛋白法，輕搖觀察結果；發生凝集爲陽性，反之爲陰性，共發現稀·臨床研究·有血型7例。

在我們對稀有血型篩選過程中，有4種稀有血型是採(cǎi)用篩選稀有等位基因的方法。通過採(cǎi)用PCR的定點誘變技術，我們成功構建出含有突變SNP位點的s和Oka血型等位基因的标準質粒，制備(bèi)出稀有血型等位基因突變點片段，應用在對照分子生物學方法篩選稀有血型。組建多個多重PCR體系，檢測等位基因。